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深度解讀

西安光機所成功研制激光掃描實時立體顯微鏡

來源:人民網(wǎng)2017-02-17 我要評論(0 )   

據(jù)中國科學院網(wǎng)站消息,日前,中國科學院西安光學精密機械研究所瞬態(tài)光學與光子技術(shù)國家重點實驗室(簡稱:瞬態(tài)室)超分辨成像團

 據(jù)中國科學院網(wǎng)站消息,日前,中國科學院西安光學精密機械研究所瞬態(tài)光學與光子技術(shù)國家重點實驗室(簡稱:瞬態(tài)室)超分辨成像團隊研制成功雙光子激發(fā)激光掃描實時立體顯微鏡,首次把基于雙目視覺的立體顯微方法和高分辨率雙光子激發(fā)激光掃描熒光顯微技術(shù)結(jié)合在一起,實現(xiàn)了對三維熒光樣品的高速立體成像,相關研究成果發(fā)表在2016年12月刊的PLOS ONE 雜志上,并被授權(quán)國家發(fā)明專利(專利號ZL201210384895.4)。

  當代生命科學研究對光學顯微技術(shù)提出了越來越高的要求——更高的空間分辨率、更大的成像深度、更快的成像速度。特別是對于生物活體顯微成像來說,生物組織對光的散射使得噪聲大大增強,嚴重影響了空間分辨率和成像深度。為了提高成像深度,雙光子激發(fā)激光掃描熒光顯微技術(shù)自20世紀90年代提出后被廣泛應用于神經(jīng)成像等領域,但是其逐點掃描的成像方式嚴重制約了成像速度。因為高分辨率光學顯微鏡的景深很小,要對樣品完成三維成像,通常需要數(shù)十層乃至上百層的二維圖像進行疊加重建得到,圖像采集和處理一般需要數(shù)分鐘甚至數(shù)十分鐘,要快速實時地獲取和顯示三維圖像非常困難。

  瞬態(tài)室超分辨成像團隊在研究員姚保利和葉彤的帶領下,以雙目視覺原理和貝塞爾光束產(chǎn)生擴展焦場為基礎,提出了由四個振鏡組成的激光束立體掃描裝置,實現(xiàn)了對貝塞爾光束的橫向位置和傾角共三個維度的控制,突破了只有兩個自由度的傳統(tǒng)激光掃描不能實時切換視角的限制。通過對四振鏡立體掃描裝置的優(yōu)化設計和控制,實現(xiàn)了對貝塞爾光束的三自由度快速掃描,可在毫秒量級進行雙視角切換,從而解決了激光掃描立體顯微成像系統(tǒng)中雙光路同時成像的技術(shù)難題,首次實現(xiàn)了基于雙視角實時激光掃描的立體顯微成像和顯示系統(tǒng)。該系統(tǒng)可對樣品進行立體動態(tài)成像和實時雙目立體觀測,其三維成像速度比傳統(tǒng)的逐點掃描方式提高了一到兩個數(shù)量級。該雙光子立體顯微系統(tǒng)為活體生物的三維實時成像和顯示提供了一種新的觀測工具。

  “它可以讓我們像觀看立體電影一樣實時地觀測動態(tài)的三維微觀世界,無需光切片,無需耗時的三維圖像重構(gòu)。”楊延龍如此總結(jié)這套系統(tǒng)的特點,他負責設計和完成了其中的立體掃描和成像顯示的關鍵部分。“雙目視覺成像是非常高效的三維信息獲取方式,但是現(xiàn)有的體視顯微鏡,空間分辨率和景深互相制約,我們利用三自由度掃描的貝塞爾光束進行非線性熒光激發(fā)突破了這種限制。”

  這項研究先后在中科院“百人計劃”和國家自然科學基金的支持下,從基本原理驗證、關鍵技術(shù)突破,到原理樣機完成,經(jīng)歷了從基礎研究到應用集成的各個環(huán)節(jié)。目前,課題組正在與國內(nèi)外相關科研機構(gòu)開展生物醫(yī)學應用的合作研究,期望盡快將該項技術(shù)應用于生物活體三維快速成像和顯示領域。

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激光掃描立體顯微鏡
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