非線性成像技術(shù)是一種行之有效的工具,其通過提供獨特的數(shù)據(jù)來幫助生物學(xué)家將特定的分子活動與細胞乃至整個生物體的功能和結(jié)構(gòu)緊密聯(lián)系起來。目前有兩大主要發(fā)展趨勢影響著可調(diào)諧超快激光器的設(shè)計,以實現(xiàn)在衍射極限或近衍射極限情況下的非線性顯微成像:第一是需要更長的波長來實現(xiàn)更深度的成像和更少的光損傷;第二是使用更加靈活的系統(tǒng)來支持多模式成像。同時,系統(tǒng)靈活性不但能減少實驗的建立時間,而且還能令激光器的價值最大化。
更寬的調(diào)諧范圍和更長的激發(fā)波長
非線性成像能夠受益于超快激光光源更寬的調(diào)諧范圍,尤其是在長波長區(qū)域。更寬的調(diào)諧范圍能夠支持熒光體-染料、指示劑和熒光蛋白的樣品需求,這些樣品在尖端生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用不斷增加。此外,對于二次諧波和三次諧波成像而言,更寬的調(diào)諧范圍能夠使這些成像技術(shù)工作在一個更加合適的波段,而這一波段正好能夠與其他實驗參數(shù)和限制相匹配。最為重要的是,擴展超快顯微鏡激光器的調(diào)諧范圍到更長波長,使得對更深層次組織的成像成為可能(見圖1)。
圖1:更長的波長實現(xiàn)更深層次的組織成像。圖中小鼠腦部毛細血管的MPE照片,是利用AlexaFluor568和相干公司的ChameleonVisionII激光器實現(xiàn)的雙光子激發(fā)成像。
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